2008-06-2
基因枪操作教程
以前给大家介绍过基因枪操作视频，当时提供了下载，不过有朋友反映下载不全，经验证，确实如此（感谢 hmilybaby 提醒），现放到youtube
看完part1，感兴趣的请到我的youtube浏览全部。
另外，与大家分享我的基因枪操作protocol，希望对您的实验有所帮助
1) 将BIO-RAD基因枪放置在较大型号的超净工作台上，紫外灯杀菌30 min以上，70%乙醇擦净基因枪真空室及各部件；
2) 阻挡网和装膜器在70%酒精中浸泡15 min，用酒精灯烤干；
3) 载体膜、可裂膜（1100psi）于70%乙醇中消毒15 min，然后置于无菌滤纸上，在超净台上吹干；
4) 装弹，取10 μl子弹液均匀涂在载体膜中央，待干；
5) 取出盛载体膜的器件，拧开盖子，先将阻挡网放入凹槽中，然后把装有载体膜的器件倒扣于凹槽上，拧紧盖子；
6) 可裂膜装在固定盖中，并旋紧；
7) 将组装好的盛载体膜的器件放在真空室上数第二个格子里，载有要轰击的愈伤组织的培养皿放在上数第四个格子里，轰击距离为5 cm；
8) 抽真空：按VAC键，当真空度达到25～28 inches Hg时，将VAC键直接锁定在HOLD位置；
9) 轰击：按住FIRE键，直至可裂膜爆裂，再按VENT键，使真空表指针回零，打开真空室小门，取出样品。
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